مقالات این مجله با دسترسی آزاد توسط دانشگاه علوم پزشکی اردبیل تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است.
زمینه و هدف: شناسایی آنتیژنهایی از بروسلا که بتوانند پاسخ ایمنی پروتکتیو تولید کند بسیار مورد علاقه محققین میباشد. لذا بایستی آنتیژنهای مختلف بروسلا برای دستیابی به این اهداف مورد ارزیابی قرار بگیرد. در این مطالعه ما ژن 31 کیلودالتونی بروسلا ملی تنسیس M16 را در اشیرشیا کلی کلون و بیان نمودیم.
روش کار: ژن کدکننده پروتئین غشای خارجی 31 کیلودالتونی بروسلا ملیتنسیس با پرایمرهای اختصاصی تکثیر و در حامل پلاسمیدی pJET1/2 و متعاقبا در pET28a (+) کلون شد و در هر دو پلاسمید تعیین توالی شد. القای تولید پروتئین نوترکیب با IPTG صورت گرفت. پروتئین نوترکیب با رزین نیکل جداسازی شد و خاصیت آنتی ژنیک آن با وسترن بلات و آنتی بادی پلی کلونال خرگوشی تایید شد.
یافته ها: پروتئین غشای خارجی 31 کیلودالتونی بروسلا ملیتنسیس حاوی 241 اسید آمینه است که با موفقیت کلون و با تعیین توالی تأیید شد. این آنتی ژن در میزبان اشریشیاکلی بیان و تخلیص شد. نتایج وسترن بلات و تعیین توالی نشاندهنده صحت تولید پروتئین نوترکیب و حفظ ساختار اپی توپی آن میباشد.
نتیجه گیری: نتایج این مطالعه نشان داد که اشریشیاکلی میزبان بیانی خوبی جهت تولید پروتئین غشای خارجی 31 کیلودالتونی بروسلا ملیتنسیس محسوب میشود.
Khodadadi S, Mohabati Mobarez A, Harzandi N, Tabaraei B, Khoramabadi N, Bakhtiyari A et al . Cloning and Expression of 31kDa Outer Membrane Protein of Brucella melitansis in E.coli. J Ardabil Univ Med Sci 2012; 12 (1) :33-39 URL: http://jarums.arums.ac.ir/article-1-149-fa.html
خدادادی صاینه، محبتی مبارز اشرف، هرزندی ناصر، تبرایی بهمن، خرم آبادی نیما، بختیاری امیر و همکاران.. کلون و بیان پروتئین غشای خارجی 31 کیلودالتونی بروسلا ملی تنسیس در اشریشیاکلی. مجله دانشگاه علوم پزشکی اردبیل. 1391; 12 (1) :33-39