[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: صفحه اصلي :: درباره نشريه :: آخرين شماره :: تمام شماره‌ها :: جستجو :: ثبت نام :: ارسال مقاله :: تماس با ما ::
:: دوره 14، شماره 2 - ( تابستان 1393 ) ::
جلد 14 شماره 2 صفحات 107-117 برگشت به فهرست نسخه ها
بررسی بیان ژن و خالص سازی زیر واحدهای S100 A8 , S100 A9 کالپروتکتین و بررسی ساختارآنها
حمیده اصغری، نعمت الله غیبی، کوروش گودرزوند چگینی، مهدی سهمانی، داریوش ایلغاری
چکیده:   (5609 مشاهده)

  زمینه و هدف: کالپروتکتین، S100 A8 و S100 A9 در فرآیندهای مهمی نظیر پیام رسانی و تنظیم پاسخ های التهابی نقش دارند. در این مطالعه، بیان S100 A8 و S100 A9 بصورت نوترکیب، خالص سازی و بررسی ساختار آنها انجام گردید.

  روش کار: در این مطالعه تجربی از pET15b به عنوان حامل توالی کد کننده ژنهای S100 A8, S100 A9 انسانی و از ( E.coli BL21 (DE3  به عنوان میزبان استفاده گردید. بیان ژن و فرآیند خالص سازی از طریق SDS-PAGE مورد ارزیابی قرارگرفت. خالص سازی پروتئینها با استفاده از رزین Ni-NTA و بر اساس میل ترکیبی آن به His-Tag پروتئین های نوترکیب انجام گرفت. ساختار سوم پروتئین ها با طیف سنج فلورسانس بررسی شد.

  یافته ها: زیر واحدهای مذکور 4-3 ساعت بعد از القاء و دمای 37 درجه سانتی گراد بیان بالایی را نشان دادند. درصد بالایی از پروتئین S100A9 در فاز اینکلوژن بادی نشان داده شد، در حالیکه زیر واحد S100A8 عمدتا بصورت محلول بیان گردید. S100A8 و S100A9 در غلظت mM 100 ایمیدازول خالص سازی گردید. در بررسی طیف سنجی نشان داده شد که اسید آمینه تریپتوفان در ساختار های داخلی قرار گرفته و کمتر در معرض محیط آبی است.

  نتیجه گیری: در این مطالعه زیر واحدهای S100A8 و S100A9 بصورت نوترکیب بیان شده و تخلیص گردید. همچنین، ساختار آنها مورد تایید قرار گرفت.

واژه‌های کلیدی: S100A8، S100A9، E.coli BL21(DE3)، Ni-NTA، طیف سنجی فلورسانس، pET15
متن کامل [PDF 249 kb]   (1477 دریافت)    
نوع مطالعه: مقاله اصیل | موضوع مقاله: تخصصي
دریافت: ۱۳۹۲/۹/۱۵ | پذیرش: ۱۳۹۳/۲/۲۵ | انتشار: ۱۳۹۳/۴/۹
ارسال پیام به نویسنده مسئول

ارسال نظر درباره این مقاله
نام کاربری یا پست الکترونیک شما:

CAPTCHA


XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Asghari H, Gheibi N, Goodarzvand Chegini K, Sahmani M, Ilghari D. Evaluating Gene Expression, Purification and Structural Characterization of the Calprotectin Subunits of S100 A8and S100 A9. J Ardabil Univ Med Sci. 2014; 14 (2) :107-117
URL: http://jarums.arums.ac.ir/article-1-639-fa.html

اصغری حمیده، غیبی نعمت الله، گودرزوند چگینی کوروش، سهمانی مهدی، ایلغاری داریوش. بررسی بیان ژن و خالص سازی زیر واحدهای S100 A8 , S100 A9 کالپروتکتین و بررسی ساختارآنها . مجله دانشگاه علوم پزشکی اردبیل. 1393; 14 (2) :107-117

URL: http://jarums.arums.ac.ir/article-1-639-fa.html



دوره 14، شماره 2 - ( تابستان 1393 ) برگشت به فهرست نسخه ها
مجله دانشگاه علوم پزشکی اردبیل Journal of Ardabil University of Medical Sciences
Persian site map - English site map - Created in 0.11 seconds with 32 queries by YEKTAWEB 3925